Geminivirus en tomate en Baja California Sur: identificación, caracterización y epidemiología

Abstract

Al estudiar la etiología de la enfermedad del “enchinado foliar” en el cultivo del tomate en Baja California Sur (BCS), se detectaron tres geminivirus no descritos y uno previamente reportado en México. Las pruebas de DAS-ELISA, la separación electroforética de la forma replicativa (FR) del ADN viral, los análisis de hibridación molecular y la amplificación por PCR nos indicaron que estos geminivirus tienen dos moléculas de ADN de cadena sencilla (bipartitas) y que pertenecen al género Begomovirus. Las reacciones de PCR fueron realizadas con iniciadores genéricos y específicos que amplifican los genes: AV1 (CP), AC1 (Rep), AC2 (TraP), AC3 (REn), incluyendo la región intergénica (RI). Los productos de PCR clonados y secuenciados se compararon por alineamientos locales (BLAST) usando como referencia los geminivirus de la base de datos del NCBI (GenBank). Las secuencias que produjeron las más altas identidades fueron comparadas por alineaciones múltiples en el programa MegAlign (DNASTAR) basados en la secuencia nucleotídica (nt) completa del componente A (ADN-A) o en un fragmento (RI-1.1 kb) que incluye la región amino terminal de Rep y CP, así como la RI. En el área de La Paz se detectó un geminivirus con un 73.8 % (nt) de identidad (ADN-A) con el virus del enrollamiento severo del tomate (Tomato severe leaf curl virus-ToSLCV) y un 83.8 % de identidad (RI-1.1 kb) con un geminivirus parcialmente caracterizado, tentativamente nombrado virus del jaspeado ligero del tomate (Tomato mild mottle virus, ToMMoV). En la misma región se encontró un geminivirus con un 98 % de identidad (RI-1.1 kb) con la variante de Tamaulipas del virus del mosaico dorado del chile (Pepper golden mosaic virus-PepGMV-[Tam]). En la región de el Calandrio se detectó un geminivirus con un 82.8 % de identidad (RI-1.1 kb) con el ToSLCV. Finalmente, en el Carrizal se detectó un geminivirus con la identidad más alta (90.2%) con el virus aislado de La Paz. Basados en los análisis de identidad, filogenia y estructura de iterones estos geminivirus fueron designados como: chino del tomate de La Paz (Tomato chino de La Paz virus-ToChLPV [AY339618]), chino del tomate de el Calandrio (Tomato chino Calandrio virus-TChCV [AY336088]) y chino del tomate de Baja California Sur (Tomato chino Baja California Sur virus-ToChBCSV [AY339619]). Los virus fueron experimentalmente inoculados por varios métodos, observándose diferentes eficiencias de transmisión (EfT). Mecánicamente se obtuvo una EfT de 35% y un 100% por biobalística y por injerto, mientras que por medio de mosquitas blancas (mb) se obtuvo una EfT del 65 al 83.3 %. Los síntomas observados en las plantas infectadas experimentalmente (arrugamientos foliares, mosaicos, enanismo y reducción de foliolos) fueron similares a los observados en infecciones naturales. El rango de hospedantes se encontró delimitado a la familia Solanaceae, donde el tomate y el chile son hospedantes naturales, mientras que el tomatillo (Physalis ixocarpa), toloache (Datura discolor) y tabaquillo (Nicotiana glauca [asintomática]) se encontraron como hospedantes alternos. Las poblaciones más altas de mb fueron registradas en junio (11 mb/hoja) coincidiendo con las altas incidencias (92-100%) de la enfermedad y altos niveles de severidad (9 en escala de 1-10). Se detectó la presencia de los biotipos A y B de Bemisia tabaci, transmisores específicos de estos geminivirus e involucrados con la enfermedad del “chino del tomate de BCS”.