Efecto de oligodeoxinucleotidos CpG sobre la modulación de la respuesta inmune, antioxidante y morfología intestinal de pargo amarillo (Lutjanus argentiventris)
Texto completo PDF:
Fecha
2017Autor
Murillo Higuera, Ylenia
Metadatos
Mostrar el registro completo del ítemResumen
Los oligodeoxinucleótidos Citocina- Guanina (ODN CpG) son secuencias sintéticas cortas de ADN que contiene dinucleótidos CpG no metilados reconocidos a través del Receptor Tipo Toll-9 (TLR9), que han demostrado activar el sistema inmune de peces al ser administrados vía intraperitoneal, sin presentar daño histopatológico asociado a la inmunoestimulación. Sin embargo este efecto depende de la longitud de la secuencia, el número de motivos CpG, posición, espaciado y las bases circundantes de estos motivos, catalogándolos como especie-especifico. Actualmente, el estudio de los órganos asociados a la producción de mucus en peces (como la piel, branquias, nasofaringe e intestino) ha ido en incremento, por ser el primer contacto entre agentes patógenos y huésped, resultando ser una de las primeras barreras del sistema inmune. Sin embargo, se desconoce si los ODN CpG pueden tener un efecto inmunoestimulante en este tipo de tejido en peces, específicamente en la producción de mucus. Por tanto, el objetivo de esta investigación fué evaluar el efecto inmunoestimulante de diferentes ODN CpG sintéticos en el pargo amarillo (Lutjanus argentiventris). Se llevó a cabo un experimento in vivo con juveniles (L. argentiventris), donde se evaluaron 7 diferentes tratamientos (inyección intraperitoneal), cinco tratamientos con diferentes CpGs, un tratamiento con Vibrio parahaemolyticus + PBS y un control con PBS. Se realizaron cuatro muestreos (día 1, 3, 7 y 10) de hígado, bazo e intestino. Se determinó la actividad enzimática antioxidante, expresión de genes inmunorelevantes, el análisis histológico de intestino por microscopia óptica, así como la cuantificación de mucinas ácidas y neutras. Los resultados obtenidos demostraron que los ODN CpG1826, 1670 y 2006, tienen la capacidad de modular la expresión tanto en bazo como intestino de interlucinas proinflamatorias IL-β e IL-8 (4 veces más que el control), factores de transcripción asociados a la maduración de células T y B (ILF2/NF45) y producción de interferón (IRF7). Así mismo, se observó un incremento en la producción de mucinas neutras sin registro de daños histopatológicos en intestino; no se observó un efecto significativo en la actividad de enzimas antioxidantes (SOD, CAT) descartando un posible efecto por estrés. Así mismo, pudimos comprobar que uno de los principales componentes que afecta la respuesta inmune de L. argentiventris por la administración vía intraperitoneal de ODN CpG, tanto en bazo como en intestino, son los factores humorales asociados a la respuesta pro-inflamatoria. Sin embargo, no se observó la sobrexpresión de TLR9 y NFκβ, sugiriendo un posible efecto de regulación negativa en la expresión o el reconocimiento por el TLR21, un homólogo del patrón de reconocimiento de TLR9 en peces y aves.