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dc.contributor.advisorArcos Ortega, Guadalupe Fabiola
dc.contributor.authorSerrano Silvas, Santos René
dc.date.issued2016es_MX
dc.identifier.urihttp://dspace.cibnor.mx:8080/handle/123456789/526
dc.description.abstractLa centolla (Lithodes santolla, Molina 1782), es un crustáceo decápodo que habita en aguas sub-antárticas y se distribuye desde Chiloe hasta Tierra del Fuego en aguas del Océano Pacífico y desde el estrecho de Magallanes hasta aguas profundas frente las costas de Uruguay en el Océano Atlántico, con grandes concentraciones de individuos en el Estrecho de Magallanes, el canal de Beagle y por debajo del paralelo 50° S. Debido a su abundancia en la región de Magallanes y Antártica chilena, la centolla ha constituido una importante pesquería mixta desde 1930 y es uno de los crustáceos con mayor importancia económica en esta región. Sin embargo, a pesar de su importancia como recurso pesquero, se conoce muy poco sobre sus procesos reproductivos especialmente desde una perspectiva molecular. Dado su relevancia, en este estudio se caracterizó la ovogénesis y vitelogénesis de Lithodes santolla mediante el uso de indicadores histológicos e histoquímicos (diámetro de los ovocitos, porcentaje de triglicéridos y porcentaje de fosfolípidos), la composición bioquímica (proteínas totales, lípidos totales, triglicéridos, carbohidratos totales y glucosa) de gónada, hepatopáncreas y hemolinfa y análisis moleculares (RT-qPCR). Los resultados obtenidos mediante tinción con hematoxilina-eosina, medición del tamaño de los ovocitos y observación de su morfología mediante microscopia de campo claro demuestran que el proceso de ovogénesis de L. santolla está caracterizado por ovogonias y 9 tipos diferentes de ovocitos (nucléolo cromatina, perinucléolo temprano, perinucléolo tardío, glóbulo lipídico, glóbulo de vitelo temprano, glóbulo de vitelo tardío, postvitelogénico, migración de la vesícula germinal y rompimiento de la vesícula germinal) y que estos se pueden clasificar en 5 estadios de desarrollo gonádico (proliferación, previtelogénesis, vitelogénesis, madurez y desove); adicionalmente, se observaron e identificaron ovocitos atrésicos. Los análisis bioquímicos mostraron que las concentraciones de proteínas totales, lípidos totales y triglicéridos en gónada aumentaron conforme progresaba el desarrollo gonadal y se observó una correlación positiva y significativa entre el contenido de proteínas, lípidos y triglicéridos en el ovario y el diámetro de los ovocitos. El incremento en el contenido de lípidos en el ovario ocurre como resultado del proceso de maduración gonadal, sin embargo, no se observó un decremento en la concentración de lípidos en el hepatopáncreas como resultado de una movilización de reservas, lo que sugiere que los requerimientos lipídicos del ovario durante el desarrollo gonadal dependen en mayor medida de la ingesta dietaría que de los lípidos almacenados en el hepatopáncreas. No obstante, se observó un decremento en el contenido de proteínas en el hepatopáncreas junto con un respectivo aumento en hemolinfa en las etapas tardías del desarrollo gonadal, sugiriendo que las proteínas son movilizadas al ovario en esta fase. Por otro lado, se observó una correlación positiva y altamente significativa entre la concentración de triglicéridos en hemolinfa y el diámetro de los ovocitos por lo que esta correlación podría ser utilizada como un indicador bioquímico del grado de madurez ovárica de una hembra. Finalmente las secuencias obtenidas de la caracterización molecular mostraron similitud con secuencias de Ferritina, proteína asociada a la proliferación (PA2G4) y CDP-diacilglicerol pirofosfatasa entre otras.es_MX
dc.language.isoEspañoles_MX
dc.publisherCentro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C.es_MX
dc.titleCaracterización morfológica, bioquímica y molecular de la vitelogénesis de las hembras del crustáceo subantártico centolla (Lithodes santolla)es_MX
dc.typeTesises_MX
dc.documento.idserrano_ses_MX
dc.documento.instCIBNORes_MX
dc.dirtesis.gradoMaestría en Ciencias en el Uso, Manejo y Preservación de los Recursos Naturaleses_MX
dc.dirtesis.disciplinaBiotecnologíaes_MX
dc.dirtesis.universidadCentro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C.es_MX
dc.dirtesis.facultadPosgrado en Recursos Naturaleses_MX
dc.documento.fecha2016-09-19
dc.description.abstractenThe southern king crab, Lithodes santolla (Molina 1782), is a decapod crustacean found in Antarctic waters and is distributed from Chiloe (South Pacific) to Tierra del Fuego, and from the Magellan Strait to Uruguay (South Atlantic), but has been particularly abundant in Strait of Magellan, the Beagle Channel, and south to 50º S. Because of their abundance in Magellan and Chilean Antarctic región, L. santolla had constituted a mixed fishery since the 1930s, and is one of the crustaceans with the highest commercial importance along these coasts. Despite their relevance, little is known about the reproductive processes especially from a molecular perspective. Given its relevance, in this study the oogenesis and vitelogénesis of Lithodes santolla was characterized using histological and histochemical indicators (oocyte diameter, triacylglycerides and phospolipides), biochemical composition (total protein, lipid and carbohydrate) of gonad, hepatopancreas (HP) and hemolymph and molecular analyses (RT-qPCR). Based on light microscopic observations of cells' sizes, morphology, and staining with Hematoxylin-Eosin, the female germ cells of Lithodes santolla could be classified into oogonias and nine different types of oocytes, which include chromatin nucleolus oocytes, early perinucleolus oocytes, late perinucleolus oocytes, oil globule oocytes, early yolk granulate oocytes, late yolk granulate oocytes, postvitelogenic oocytes, germinal vesicle migration oocytes (GVM) and germinal vesicle breakdown (GVB) oocytes. Additionality atretic oocytes were found in some gonads but their diameter was not determined. The whole oogenesis cycle of Lithodes santolla was divided into five stages based on the amount and types of oocytes present in each stage. Stage 0 and I are proliferation and previtellogenic stages, stage II are vitellogenesis stage, stage III and IV are maturity and spawned stages. The presence of oogonia and previtellogenic oocytes among fully mature oocytes in stage 3 could reflect the capacity of the ovary of L. santolla females to start a new full maturity cycle in a short time period after spawned. The biochemical analyses showed that the proteins, lipids and triglycerides content in gonad increased in relation to gonadal development and a positive and significant correlation was observed between concentration of lipids, triglycerides and proteins in ovary and oocyte diameter. The increase of lipid levels in the ovary occurred as a result of the maturation process, but no concomitant decrease was registered in HP lipids. Under these circumstances, the lipid requirements of the developing ovary in Lithodes santolla seem to be more dependent on the ingestion of dietary lipids than on HP reserves. However, a decrease in protein levels was observed in HP towards the later stages of oogenesis together with an increment of protein content in hemolymph, suggesting that proteins are mobilized to ovary. On the other hand a significant and positive correlation was observed between triglycerides content in hemolymph and oocyte diameter and this correlation can be used as biochemical indicator of gonadal maturity. Finally, the sequences obtained from the molecular characterization showed similarity to sequences like Ferritin, proliferation-associated protein 2GA (PA2G4) and CDP-diacylglycerol pyrophosphatase.es_MX
dc.documento.subjectLithodes santolla; ovogénesis; vitelogénesis; desarrollo gonadal; composición bioquímica.es_MX


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