Efecto de organismos productores de toxinas PSP y DSP en la expresión de genes de respuesta inmune en juveniles de Crassostrea gigas (Thunberg, 1793).
Resumen
Crassostrea gigas, es la especie de ostión más cultivada en el mundo, constituye un
modelo biológico de gran importancia económica. Desde 1993 se han registrado mortalidades
recurrentes en las principales zonas del cultivo y aunque se han identificado episodios de
Florecimientos Algales Nocivos (FAN) previos a estos episodios de mortalidad, no se ha podido
establecer aun una clara correlación.
En el litoral Mexicano, el impacto de los FAN de dinoflagelados tóxicos sobre diversas especies
marinas, entre ellas los moluscos bivalvos, es un fenómeno que se ha observado con mayor
frecuencia. En el presente trabajo se expusieron a juveniles de 3-5 mm de C. gigas a una
combinación de los dinoflagelados Prorocentrum lima y Gymnodinium catenatum productores
de toxinas DSP y PSP respectivamente, obteniendo el perfil de expresión de distintos genes
relacionados con la respuesta inmune y el sistema defensa (lgbp, tlp, inm, if44, cp1 y cvt). En el
bioensayo se consideraron como variables el tiempo de exposición ( 1, 3, 5 y 7 días) y la
combinación de tres concentraciones celulares de dinoflagelados tóxicos, TR1 (G.catenatum
3X103 cel mL-1 y P.lima 3X102 cel mL-1), TR2 (G.catenatum 1.5X103 cel mL-1 y P.lima
1.5X103 cel mL-1) y TR3 (G.catenatum 3X102 cel mL-1 y P.lima 3X103 cel mL-1), empleando
Isochrysis galbana (7.5X105 cel mL-1) como alimento para el grupo control C1. El estudio de la
expresión se llevó a cabo mediante la técnica de qPCR. Se realizó la validación de los genes de
referencia, para estas condiciones experimentales, siendo TUB, ACT y GAPDH los más
estables con base en los algoritmos utilizados (GeNorm, NormFinder). La exposición de los
ostiones a G. catenatum y P. lima provocó un aumento en el nivel de transcripción de genes que
codifican proteínas implicadas en la respuesta inmune, principalmente en los tratamientos donde
P. lima se encontraba mayormente disponible. Por lo cual, los cambios a nivel transcripcional
de los genes monitoreados fueron tiempo-tratamiento dependientes. En general, estos cambios
sugieren una relación directa con la ingestión de los diferentes concentraciones de
dinoflagelados tóxicos en cada tratamiento. El incremento en la expresión de cp1 podría indicar
un proceso inflamatorio severo desencadenando daño tisular en el ostión a partir del 5to día de
exposición, así mismo el gen inm podría desempeñar un papel importante en la activación de
proteínas a mediano y largo plazo, y probablemente tenga una función de opsonina facilitando
la fagocitosis de cuerpos reconocidos como extraños. Se pudo corroborar la función del
producto del gen tlp como receptor en el sistema de reconocimiento de patrones moleculares
para la detección de patógenos, e iniciación de la respuesta inflamatoria. En los diferentes
tratamientos, la modulación de los genes cvt, lgbp e if44 indica el reconocimiento de agentes
extraños por el sistema inmune de C. gigas, lo que indica que estos genes podrían desempeñar
funciones en la citoprotección e inmunidad, principalmente durante las primeras 24 h de
exposición, confirmando su actuación como primera línea de defensa en el ostión. Los
resultados sugieren que, aunque a las dosis ensayadas no son letales, los dinoflagelados tóxicos
P. lima y G. catenatum pueden afectar de manera significativa la capacidad de respuesta del
sistema inmune a través de la modificación de los niveles de transcripción de los genes antes
mencionados Esta combinación de efectos, puede promover una mayor susceptibilidad de C.
gigas a las infecciones, sobre todo cuando se producen las FAN en combinación con otros
factores de estrés, como por ejemplo durante episodios de “mortalidad de verano''. Así las FAN
podrían potenciar el riesgo de factores de estrés adicionales en ambientes naturales y/o acuícolas y, como consecuencia, afectar significativamente la supervivencia del ostión.