Bioselección de péptidos y fragmentos de anticuerpos desplegados en fagos que se unen al virus del síndrome de la mancha blanca

Abstract

El virus del síndrome de la mancha blanca (WSSV) continúa siendo el principal patógeno del camarón cultivado. Debido a las enormes pérdidas económicas que genera es una amenaza para la permanencia y crecimiento de la industria. Hasta ahora no existe ningún tratamiento efectivo contra la infección. En la búsqueda de estrategias potenciales para el control de este patógeno se han utilizado anticuerpos y un péptido que se unen a proteínas virales estructurales claves para la infección con el fin de neutralizarlas. El propósito de este estudio fue bioseleccionar por primera vez fragmentos variables de cadena sencilla de anticuerpos (scFv) humanos, dodecapéptidos lineales y heptapéptidos constreñidos desplegados en fagos que pudieran unirse al WSSV de forma específica utilizando la tecnología de phagedisplay. Para ello se tamizaron, mediante tres rondas de bioselección, tres librerías de origen no inmune contra WSSV inactivo inmovilizado. El repertorio de fagos anti-WSSV seleccionados y algunos clones fueron sometidos a prueba de phage ELISA para probar su especificidad observándose clones positivos y un incremento de la señal de la ronda I a la III en todos los casos. Los resultados sugieren que durante las rondas de bioselección se enriquecieron las secuencias más afines por el WSSV y que tanto las poblaciones de fago-scFv y fago-péptidos seleccionados durante la tercera ronda del biopanning, como los clones que despliegan dodecapéptidos L2.6, L3.1; heptapéptidos 7C2.3, 7C2.4, 7C2.7, 7C3.1, 7C3.3, 7C3.4 y scFv S2.5, S3.3, S3.11, S3.12, son potenciales neutralizantes del WSSV dada la especificidad de su unión a proteínas estructurales del virus o una herramienta biotecnológica útil en su detección o investigación.