EXPRESIÓN DE HEMO OXIGENASA Y CITOCINAS PROINFLAMATORIAS (TNF-α, IL-1β, IL-6) EN LEUCOCITOS DE Tursiops truncatus Y Homo sapiens EN RESPUESTA A RETOS PROINFLAMATORIOS

Abstract

"Los cetáceos son un grupo de especies que cuenta con adaptaciones y respuestas fisiológicas a la vida acuática, así como con un robusto sistema de defensa antioxidante que les permite mitigar el daño ocasionado por los ciclos de isquemia/reperfusión asociados con el buceo. Existe una mayor comprensión de las cascadas de señalización que caracterizan la inflamación isquémica en humanos que en cetáceos y, por lo tanto, los mecanismos moleculares y bioquímicos asociados a las adaptaciones fisiológicas de cetáceos para tolerar eventos inflamatorios no son comprendidos en su totalidad. La hemo oxigenasa (HO) es una proteína citoprotectora que participa en la respuesta antiinflamatoria. La HO cataliza el primer paso en la degradación oxidativa del grupo hemo. La isoforma inducible HO-1 es regulada por varios estímulos, incluyendo hipoxia, estrés oxidativo y mediadores inflamatorios. El objetivo de este estudio fue caracterizar la HO-1 del tursión (Tursiops truncatus) in silico y comparar su estructura con la de mamíferos terrestres, así como evaluar la respuesta de HO-1 y citocinas proinflamatorias (IL-1β, IL-6 y TNF-α) en respuesta a retos proinflamatorios en leucocitos de tursiones en comparación con leucocitos de humanos. La secuencia ‘upstream’ de HO-1 fue obtenida de las bases de datos NCBI y Ensemble, y la estructura del gen fue determinada con herramientas bioinformáticas. Se identificaron cinco exones y cuatro intrones, y en la región ‘upstream’ se detectaron elementos reguladores proximales. La ‘huella digital’ de HO-1 y la His-25 se encontraron altamente conservadas en las especies analizadas. El alineamiento de secuencias aminoacídicas y la evidencia de selección negativa sugieren que HO-1 es una proteína conservada; sin embargo, se encontraron aminoácidos con rotación diferente en el sitio activo de la molécula del tursión. En leucocitos aislados de humanos y tursiones se determinó experimentalmente el efecto del lipopolisacárido (LPS) en la expresión de los genes IL-1β, IL-6, TNF-α, HMOX1 y GAPDH, los niveles de IL-1β, IL-6, y TNF-α, así como la actividad enzimática de la HO. En los leucocitos de humano se encontró una respuesta clásica proinflamatoria, mientras que en leucocitos del tursión la respuesta fue atenuada. Se observó un aumento significativo de la actividad de HO (p<0.05) en leucocitos de tursiones expuestos a LPS. Lo anterior sugiere una regulación específica de las citocinas inflamatorias en los leucocitos tratados con LPS; ello puede conducir a respuestas diferenciales a un desafío proinflamatorio entre mamíferos marinos y terrestres. Estos resultados podrían indicar una mayor respuesta antiinflamatoria en tursiones."