Desarrollo de una vacuna oral dirigida a células M, basada en el antígeno Tc24 de Trypanosoma cruzi y el ligando Co1, utilizando Schizochytrium sp. como plataforma de producción y sistema de entrega

Abstract

"La enfermedad de Chagas es una enfermedad tropical desatendida causada por el parásito intracelular Trypanosoma cruzi. Los medicamentos disponibles no son del todo efectivos en la fase crónica y no hay vacunas disponibles contra esta enfermedad. Las microalgas representan una prometedora plataforma para la producción de vacunas de bajo costo: de entrega oral, sin la necesidad de purificación de la proteína antigénica y libres de la cadena de frío. En este trabajo se presenta el prototipo de una vacuna oral basada en el antígeno Tc24 fusionado al péptido ligando de células M Co1 (Tc24:Co1). Después del modelado de la estructura terciaria, los análisis in silico sugieren que la proteína es antigénica, no alergénica y el acoplamiento molecular indicó una posible interacción con los Receptores tipo Toll 2 y 4. Posteriormente, el gen de Tc24:Co1 se clonó en el vector inducible pAlgevir para proceder a la transformación transitoria de Schizochytrium sp. mediante Agrobacterium tumefaciens. Por Western blot se demostró la expresión de la proteína quimérica Tc24:Co1 a las 48 h post inducción con rendimientos de 632 µg/L de cultivo algal. Tras la administración oral de Schizochytrium sp. que expresa Tc24:Co1 (en dosis equivalentes a 7.5 y 15 µg de Tc24:Co1) a ratones Balb/c se encontró una respuesta inmune mediada por la producción anticuerpos específicos anti-Tc24 IgG en suero e IgA en mucosa intestinal, así como por el incremento en la producción de citocinas Th1 y Th2 en suero. Finalmente, se llevó a cabo la evaluación inmunoprotectora de Schizochytrium sp.-Tc24:Co1 en ratones mediante un reto infeccioso agudo con T. cruzi, en donde los resultados indicaron una reducción en la parasitemia. Se concluye que Schizochytrium sp.-Tc24:Co1 es un prototipo de vacuna inmunoprotectora contra la infección aguda de T. cruzi en modelo murino."