DESARROLLO DE UNA VACUNA MULTIEPITÓPICA EXPRESADA EN TEJIDO VEGETAL COMPUESTA DE DETERMINANTES ANTIGÉNICOS DE BACTERIAS ENTEROPATÓGENAS

Abstract

"A nivel mundial se estima que cerca de 1.7 millones de personas mueren al año a causa de enfermedades relacionadas con la diarrea, principalmente en países en vías de desarrollo. La vacunación es una alternativa para el control de este tipo de problemas de salud pública global. Sin embargo, se requieren nuevas vacunas de bajo costo, accesibles y fácil administración para cubrir las necesidades a nivel mundial. En este contexto, las plantas son una plataforma atractiva para la síntesis y entrega de subunidades vacunales, y aparecen como una alternativa para disminuir los costos de producción, almacenamiento y administración de agentes vacunales para este tipo de enfermedades. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue desarrollar una vacuna multiepitópica expresada en células vegetales compuesta por epítopes de antígenos de las bacterias Escherichia coli enterotoxigénica, Vibrio cholerae, Salmonella typhimurium y Vibrio parahaemolyticus, que fuera inmunogénica y capaz de conferir protección ante un reto con estos patógenos entéricos. Se diseñaron dos genes que codifican para las proteínas multiepitópicas (LTBentero y ToxAentero) compuestas de epítopes de los antígenos: LT de E. coli ETEC, CT de V. cholerae, LptD de V. parahaemolyticus y FliC de S. typhimurium. La proteína LTBentero acoplada a la secuencia de LTB y la proteína ToxAentero a la secuencia de ToxA, ambas con función de adyuvante. Estas proteínas multiepitópicas fueron expresadas en plantas de tabaco, en las cuales se observaron niveles de expresión de hasta 5.29 μg·g−1 de la proteína LTBentero y de 5.46 μg·g−1 de la proteína ToxAentero en tejido vegetal fresco. Se demostró que ambas son inmunogénicas cuando son administradas de manera oral y subcutánea en ratones BALB/c, al inducir respuestas humorales tanto en suero como en intestino mediante la producción de anticuerpos IgG e IgA específicos contra cada uno de los epítopes incorporados. En ratones previamente inmunizados de manera oral se observó una disminución de la acumulación de fluidos cuando fueron retados con la toxina CT, asimismo, se observó una supervivencia del 50% (LTBentero) y 75% (ToxAentero) cuando los ratones fueron retados con V. parahaemolyticus. "