Prototipo de una nanovacuna oral utilizando el epítope Ta2 de la toxina A de Vibrio parahaemolyticus en leucocitos de pez

Abstract

"El uso de nanopartículas en Vacunología ha aumentado en los últimos años debido a su capacidad para estimular o suprimir las respuestas inmunitarias. En este contexto, las nanopartículas de oro (AuNPs) han sido ampliamente investigadas para tratar múltiples padecimientos. Las AuNPs se han empleado para tratar desde cáncer hasta enfermedades causadas por virus o bacterias, como es el caso de Vibrio parahaemolyticus. La bacteria marina V. parahaemolyticus es responsable de causar vibriosis en camarones y peces. Recientemente V. parahaemolyticus adquirió un plásmido (plásmido pVA). El plásmido pVA posee una toxina binaria (Toxina A y Toxina B) y está asociado al Síndrome de la Necrosis Aguda del Hepatopáncreas. Un estudio, realizado en nuestro grupo de investigación, encontró que la Toxina A posee propiedades inmunomoduladoras y protectoras contra V. parahaemolyticus. Siguiendo esta línea de investigación, un sistema basado en AuNPs y epítopes de la Toxina A representa una potencial nanovacuna oral en peces. En este trabajo, un epítope de la Toxina A (Ta2) se adsorbió sobre la superficie de AuNPs por medio de interacciones electrostáticas (AuNPs-Ta2). Este sistema fue caracterizado mediante DLS, potencial Z, espectrofotometría UV-vis y Microscopía Electrónica. Además, su citotoxicidad y su potencial como inmunoestimulante, se evaluó en pruebas in vitro en leucocitos de bazo de pez (Seriola rivoliana). AuNPs-Ta2 no mostró citotoxicidad en células expuestas a concentraciones de 5.1 y 10.1 nM (con respecto a AuNPs). Se analizó la actividad de enzimas asociadas a la respuesta inmune (fagocitosis, superóxido dismutasa, catalasa, mieloperoxidasa, explosión respiratoria, óxido nítrico). Se encontraron diferencias significativas en la actividad catalasa y mieloperoxidasa de los leucocitos estimulados con el prototipo de la nanovacuna con respecto al control. El conocimiento sobre la inmunomodulación en las mucosas por AuNPs modificadas con subunidades permitirá elucidar las células, mecanismos (inductores, reguladores y efectores) y actividades funcionales. Esto contribuye al conocimiento para la manipulación del sistema inmune de las mucosas en modelo de pez. "