Efecto de las toxinas paralíticas (PSP) del dinoflagelado Gymnodinium catenatum (Dinophyceae) en el sistema de defensa de la almeja mano de león, Nodipecten subnodosus
Resumen
"Este trabajo documenta los efectos que tienen las toxinas del dinoflagelado Gymnodinium catenatum, un conocido productor de toxinas paralíticas de moluscos (PSP), en el sistema de defensa de juveniles de la almeja mano de león Nodipecten subnodosus. Estas toxinas tienen una acción bloqueante reversible y altamente específica de los canales de sodio, evitando la generación del potencial de acción en membranas excitables. Las almejas se alimentaron con diferentes concentraciones del dinoflagelado tóxico en condiciones controladas de laboratorio para determinar las tasas de ingestión y aclaramiento durante 7 horas en dos tallas; se realizaron cortes histológicos para observar el efecto de las toxinas en los distintos tejidos. Se llevaron a cabo experimentos donde se alimentó durante periodos cortos (menores a 24 h) y periodos largos de hasta 12 d con G. catenatum, suplementando la dieta con Isochysis galbana. Asimismo, se provocó un estrés severo mediante la inyección del extracto crudo de las toxinas en el músculo aductor. La extracción de las toxinas, así como la toxicidad de G. catenatum se determinaron mediante el método de ensayo ratón (AOAC), así como se obtuvo la dosis letal media (DL50) del extracto crudo de estas toxinas en N. subnodosus. Se estudió el efecto de las toxinas en términos de producción de moléculas relacionadas al sistema de defensa: enzimas antioxidantes (catalasa, superóxido dismutasa, glutatión peroxidasa), sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS: peróxidación de lípidos), enzimas hidrolíticas (lisozima, proteasas, glicosidasas, fosfatasas, lipasas y esterasas) acetilcolinesterasa, óxido nítrico, así como el conteo total de hemocitos. En los experimentos de alimentación se determinaron los efectos en los tejidos (branquias, glándula digestiva, manto y músculo) mientras que en los experimentos de inyección del extracto crudo los efectos se evaluaron en la hemolinfa. Los resultados del presente estudio muestran que los juveniles N. subnodosus no exhibieron aparentemente respuestas fisiológicas adversas cuando se alimentaron con el dinoflagelado tóxico G. catenatum a diferentes tiempos, sin embargo a concentraciones elevadas de alimento la talla más pequeña presentó la producción de pseudoheces, el cierre parcial de las valvas y la reducción en las tasas de alimentación, recuperándose después de unas horas; se observó melanización en branquias y manto, así como acumulación de hemocitos en tejidos..." "This work documents the effects caused by toxins from the dinoflagellate Gymnodinium catenatum, a known producer of Paralytic shellfish poisoning (PSP) toxins, in the defense system of Pacific lion’s paw scallop juveniles, Nodipecten subnodosus. The mode of action of these toxins involves a reversible and highly specific block of ion transport by the sodium channel and thus of the action potential in excitable membranes. The scallops were fed with different concentrations of the toxic dinoflagellate under laboratory controlled conditions to determine the ingestion and clearance rates during 7 h in two sizes; histological records were made to observe the effect of the toxins in the different tissues. Short ( 24h) and long (until 12 d) term feeding experiments with G. catenatum were carried out, supplementing the diet with a mixture of Isochrysis galbana. A severe stress was caused by means of the injection of the crude extract of the toxins in the adductor muscle. The extraction of the toxins as well as G. catenatum toxicity were carried out by mouse bioassay method (AOAC), and also lethal media dose (DL50) of these extracts was determined in N. subnodosus.The effect of the toxins in the defense system was determined: antioxidant enzymes (catalase, superoxide dismutase, gluthatione peroxidase), thiobarbitiuric acid reactive substances (TBARS: lipid peroxidation), hydrolytic enzymes (lysozyme, proteases, glycosidases, phosphatases, lypases and estereases), acetylcholinesterase, nitric oxide, as well as the total hemocyte count. In feeding experiments, the tissues were analyzed (gills, digestive gland, mantle and muscle) while in the experiments of injection of the crude extract the effects were determined in the hemolymph. The results of the present study show that the juveniles of N. subnodosus exhibited no apparent detrimental physiological responses during the feeding experiments with G. catenatum at different times, nevertheless at high concentrations of food the smallest size showed pseudofeces production, partial shell clousure and reduction of the feeding rates, recovering their physiological state after some hours; melanization in mantle and gills and hemocyte aggregation were observed..."
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