Implementación del análisis de Prostaglandinas en tejidos de ostión y Comparación de prostaglandina e2 después de Un estrés por muestreo en ostión de placer (crassostrea corteziensis) y ostión japonés (c. Gigas) y Durante el desove de c. Gigas
Resumen
En ostiones, la maduración de la gónada se encuentra regulada por cambios de
calidad y cantidad de alimento, temperatura, salinidad, y cambios químicos en el agua
que incluyen la presencia de esperma, factores que a su vez modulan la síntesis y
secreción de hormonas que controlan la reproducción, entre ellas, las prostaglandinas
(PGs). Las PGs son derivados de ácidos grasos de 20 carbonos, siendo la más común la
PGE2. Las distintas PGs pueden presentar funciones variadas dependiendo de su
concentración, el estado fisiológico del organismo y la especie. En invertebrados, se ha
descrito que las PGs modulan el sistema inmune y la reproducción, tanto a nivel de
gametogénesis como del desove. Uno de los objetivos de la presente tesis fue
cuantificar la PGE2 durante el desove y a consecuencia del estrés de muestreo en
ostiones. Para cuantificar las PGs, se compararon tres técnicas; cromatografía de
líquidos (HPLC-MS) y cromatografía de gases (CG-MS), ambas con detección por
espectro de masas, y kit de inmunoensayo (EIA) específico para PGE2. Aún cuando el
EIA presentó una ligera reacción cruzada con otras PGs y con el ácido araquidónico, sus
ventajas son que no se requiere de tantos cuidados para almacenar y procesar las
muestras, su extracto derivatizado es estable, se requiere poca cantidad de muestra y es
el método de menor costo.
Para establecer el efecto del estrés de muestreo se utilizaron ostiones de
Crassostrea corteziensis y C. gigas en diferentes muestreos. El estrés consistió en cortar
el músculo aductor para abrir las valvas y muestrear a los organismos a los 0, 3, 5, 10,
30 y 60 min. No se encontraron diferencias significativas a lo largo del tiempo después
del estrés de muestreo, sin embargo, la variación individual en los niveles de PGE2
aumentaron a partir del minuto 5, disminuyendo hasta los 60 minutos, por lo que, para
futuros muestreos para el análisis de PGs, se recomienda muestrear a cada organismo en
un lapso no mayor a 3 minutos después de abiertas las valvas.
Los niveles de PGE2 en relación al desove se analizaron en ostiones C. gigas
inducidos al desove por medio de incrementos de temperatura (de 18 a 30ºC) y por
adición de peróxido de hidrógeno (H2O2, 1 ml/l) en el agua. Los ostiones se
muestrearon antes de la inducción, durante el desove y 18-24 horas después del desove.
No se encontraron diferencias significativas a lo largo de las fases del desove inducido
por incremento de temperatura, sin embargo se observa que los niveles de PGE2
disminuyen durante el desove y disminuyen aún más después de 18-24 horas después
del desove. La inducción con H2O2 no produjo diferencias significativa durante el
desove de hembras, pero sí en machos; en ambos casos se observa que los niveles de
PGE2 tienden a aumentar durante y aún más después del desove. Los resultados
anteriores indican que el desove inducido por H2O2 se realiza por medio de PG, cuyos
niveles probablemente aumentaron debido al incremento en la activación de la enzima
ciclooxigenasa que sintetiza PG, mientras que en el desove inducido por incremento de
temperatura no se demostró que las PG estén involucradas en el proceso de desove, por
lo que se sugiere que este método de inducción se lleva a cabo por medio de un
mecanismo distinto al del aumento en la síntesis de PGE2.