Determinación sexual medioambiental, diferenciación sexual externa y estructura de la glándula androgénica en el camarón blanco del Pacífico Litopenaeus vannamei (Decapoda: Penaeidae)
Resumen
Se estudiaron efectos medioambientales sobre la determinación sexual en Litopenaeus vannamei criando postlarvas pL-1 en tres temperaturas, bajo tres fotoperiodos, en alta densidad y por inanición. Ninguna de estas condiciones medioambientales e cautiverio afectaron la determinación sexual o el desarrollo diferencial sexual en la especie. La revisión del desarrollo del endopodito del primer par de pleópodos reveló la primera diferenciación sexual externa a partir del día 50, mostrando una estructura triangular con tres setas en las hembras, mientras que en machos se mantuvo como una estructura tubular. Independientemente del tamaño de los individuos, la diferenciación sexual se presentó en juveniles desde el día 50 hasta el 90, siempre y cuando la postlarva haya alcanzado un desarrollo previo mínimo entre los 150 mg de peso corporal y 20 mm de longitud. La histología y microscopía de barrido en los vasos deferentes revelaron que la glándula androgénica (GA) es un cordón de 2 mm de largo, adherido a la región eyaculatoria subterminal del vaso deferente distal. La GA esta compuesta por células grandes y ovaladas que contienen citoplasma vacuolado, y cada célula tiene un núcleo prominente, de manera similar a las GA descritas en Malacostracos; por lo anterior se asume que debe tener la misma función en la diferenciación sexual. Se realizaron bioensayos de andrectomia en machos e implantación de GA en hembras, que después de seis meses de observación de estructuras sexuales externas y en gónada, no mostraron efecto aparente de reversión sexual. Por último, se obtuvo ARN total del vaso deferente-GA medio distal, proveniente de camarones machos ablacionados unilateralmente del pedúnculo ocular y no ablacionados, seguido de una transcripción en reversa para generar la primera síntesis de ADN complementario. La evaluación cualitativa de expresión de genes entre los dos grupos de machos se llevó a cabo mediante la amplificación de ADNc-PCR, utilizando oligos arbitrarios de secuencia conocida y la exposición de bandeo diferencial en gel de agarosa, en donde no fue posible concluir que la glándula del seno controla la síntesis de ARN de la GA. Sin embargo, los productos de PCR se utilizarán para futuras investigaciones relacionadas con la función de la AG sobre la diferenciación sexual de esta especie. Environmental effects on sex determination in Litopenaeus vannamei were studied by rearing day one postlarvae at three temperatures, under three photoperiods, at high density, and by starving. None of the environmental conditions in captivity affected sex determination or differential development of gender in this species. From day 50, the development of the endopodite of the first pair of pleopods revealed the first external sexual differentiation, showing a triangular structure with three setae in females, whereas a tubular structure remained in males. Juvenile shrimp sex differentiation took place from days 50 to 90, independent of size, only if postlarvae reached a minimum development of 150 mg of body weight and 20 mm of body length previously. Histology and scanning electron microscopy of the vas deferens revealed that the androgenic gland (AG) is a single 2-mm long cord attached in the sub terminal ejaculatory region of the distal vas deferens. The AG is composed of large oval cells containing vacuolated cytoplasm, and each cell has a prominent rounded nucleus, similar to the AG descriptions in Malacostracans; so it is assume that it should have the same function in sex differentiation. Bioassays of andrectomy on males and AG implantation on females were made, in which after six months of observation of external sexual structures and gonad, none of them showed an apparent sex reversal effect. Finally, total RNA was isolated from the distal region of the middle vas deferens-AG, from unilateral eyestalk-ablation and no-ablation males, followed by the first-strand complementary DNA synthesis by reverse transcription. Qualitative evaluation of gene expression between the two groups of males was made by cDNA-PCR amplification, using arbitrary primers of known sequence and differential banding display in agarose gel, in which it was not possible to conclude that the sinus gland controls the RNA synthesis of AG. However, PCR-products will be used for further investigations related to the function of the AG on sex differentiation of this species.
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