Identificación y evaluación de la expresión de genes relacionados con la reproducción en Litopenaeus vannamei, obtenidos a partir de librerías de tallo ocular y ovario
Author
CLAUDIA VENTURA LOPEZ
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La elevada demanda del camarón de cultivo ha llevado a los laboratorios de reproducción al empleo de técnicas como la ablación del tallo ocular con la finalidad de acelerar la maduración de los reproductores. Se sabe actualmente que es en este tejido donde se localiza el principal centro neurosecretor de los crustáceos, conocido como complejo Órgano X-Glándula sinusal, y es aquí donde se sintetizan un grupo de hormonas relacionadas con la inhibición y/o maduración gonádica. Dentro de las hormonas más comúnmente estudiadas y principalmente relacionadas a estos procesos reproductivos, se encuentran las denominadas hormonas hiperglucemiantes de crustáceos (CHH). Si bien se han logrado avances en la caracterización de la estructura de genes de la familia de las CHH, y su participación en los procesos reproductivos, a menudo la presencia de las diversas isoformas y su distribución diferencial pone de manifiesto la complejidad en la interacción de estos neuropéptidos para la regulación de los procesos asociados a la reproducción en crustáceos. En este sentido, el creciente uso de técnicas de secuenciación masiva ha permitido la identificación de diversos genes que hasta ahora solo han sido estudiados en otras especies de vertebrados e invertebrados, pero que se sabe participan en diferentes fases de los mecanismos asociados a la reproducción. Como una aproximación para determinar los genes asociados a procesos reproductivos en L. vannamei, se generaron librerías transcriptómicas de tallo ocular y ovario en el laboratorio de Genética y Mejoramiento Animal Acuícola, las cuales permitieron la identificación de varios transcritos potencialmente involucrados en la regulación de la maduración gonádica, y cuyo análisis de expresión puede ser un primer paso para la identificación de genes antes no conocidos, y de marcadores moleculares que a largo plazo puedan ser utilizados en programas de selección y mejoramiento genético. En el presente estudio, se logró la identificación y clonación parcial de diferentes transcritos involucrados en la reproducción. Algunos de los transcritos encontrados fueron analizados con fines de establecer su perfil de expresión tisular en diferentes etapas del desarrollo reproductivo del camarón así como conocer si la expresión de los mismos se asocia con la maduración gonádica evaluada a través de la expresión de vitelogenina [...] Due to the growing demand for shrimp, eyestalk ablation used to be one of the main techniques for broodstock maturation acceleration in commercial hatcheries. That is because the main neurosecretory organ in crustaceans is the X organ- sinus gland complex located in the eyestalk, and this is where a group of hormones related to the inhibition and / or induction of gonadal maturation are presumably synthesized. Those hormones belong to the crustacean hyperglycemic hormone (CHH) family, an important group of neuropeptides involved in controlling growth and reproduction in decapods species. However, while progress has been made in the characterization of the structure of CHH family members, the presence of multiple isoforms and differential tissue expression suggests there are more complex functions and interactions among these neuropeptides than what it has been elucidated for control the reproductive processes. The increased use of massive sequencing techniques has enabled the identification of several genes known to be involved in different mechanisms associated with reproduction that so far have only been studied in vertebrates and other invertebrates species. In order to further investigate the genes involved in L. vannamei reproduction, cDNA and SSH libraries derived from female eyestalk and gonads were produced, allowing the identification of expressed sequences tags (ESTs) potentially involved in the regulation of gonadal maturation. Understanding the expression pattern of the newly found genes can be a first step to identify novel genes and molecular markers, which can be used in selection programs. In the present study, different transcripts involved in reproduction were identifying and partially cloned. These transcripts were analyzed in males and females in order to establish their tissue expression profile on different reproductive developmental stages and, in the case of females, their possible association with gonadal maturation assessed through expression analysis of vitellogenin [...]
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