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dc.contributor.advisorHolguin Zefhuss, Ginaes_MX
dc.contributor.authorDávila Lule, Alfonsoes_MX
dc.date.issued2007es_MX
dc.identifier.urihttp://dspace.cibnor.mx:8080/handle/123456789/192
dc.description.abstractEn la comunicación celular en bacterias, la utilización de moléculas señales o autoinductores, permite la regulación de ciertos procesos fisiológicos dentro de una población bacteriana, cuando se alcanza cierta densidad poblacional, presentándose un fenómeno conocido como quórum sensing. En bacterias gram-negativas, la producción del autoinductor acilo homoserina lactona (AHL) interviene en la regulación de genes relacionados en producción de antibióticos, factores de virulencia, transferencia de plásmidos y en un tipo de desplazamiento coordinado, conocido como swarming o en enjambre. El desplazamiento swarming, es un tipo de movilidad que presentan las bacterias en ambientes semisólidos, donde intervienen, tanto una modificación morfológica (aumento de tamaño celular y producción de múltiples flagelos laterales), como la producción de sustancias, conocidas como biosurfactantes, que ayudan a romper la tensión superficial. Se ha reportado en bacterias patógenas de animales, que las AHLs están relacionadas en la producción de biosurfactantes, permitiendo colonizar tejidos. Sin embargo, se desconoce la presencia de este desplazamiento en bacterias aisladas de raíces de plantas. Vibrio LR6HC, es una bacteria que se aisló de raíces del mangle negro, y por sus características, es una potencial promotora de crecimiento en plantas. Se detectó la producción de las moléculas señal, 4C, 6C y 8C-HL en base a la ayuda de biosensores bacterianos, cromatografía de capa fina (TLC) y espectrometría de masas (GM/SM). Además, se observó que la bacteria presentaba movilidad swarming en 3 diferentes medios semisólidos, con diferentes fuentes nutricionales, llegando a detectarse diferentes tipos de movilidad, dependiendo del medio donde se desplace. Para relacionar la regulación de las AHL en el desplazamiento swarming, se realizó una anulación de la producción de la molécula señal, de una forma intercelular, en base a la acción de la enzima AiiA, una lactonasa que hidroliza el anillo lactona de la AHL, no permitiendo su unión con el regulador transcripcional. Se realizo una conjugación, entre cepa LR6HC y la cepa E. coli, la cual presentaba el plasmído pDSK519::aiiA. Se obtuvieron transconjugantes, y se realizó una búsqueda de aquellas que no producían AHLs, no detectadas por biosensores bacterianos y se comprobó por TLC y GM/SM. Se observó en los transconjugantes, la falta de movilidad swarming en los diferentes medios semisólidos y se comprobó por microscopia electrónica de barrido y transmisión, que la morfología de la célula no presentaba modificaciones en su tamaño, ni en sus estructuras celulares. Se observo que las células en situación de desplazamiento swarming, tenían un tamaño de hasta 2 µm de diámetro, presentando múltiples flagelos laterales y detectando la presencia de una sustancia o velo, que cubría por completo la migración de las bacterias. Se analizó, a través de métodos para detección y cuantificación de biosurfactante, que la cepa transconjugante presentaba una disminución marcada en la producción de una sustancia que puede comportarse como agente tenso activo. Además, se detecto una disminución de hasta un 60%, por parte de la cepa transconjugante no productora de AHLs, en la producción de biopelículas, las cuales están relacionadas con la producción de biosurfactantes, en Pseudomonas aureoginosa y Burkholderia cepacia. En conclusión, la producción de las moléculas señal AHLs, en la cepa Vibrio LR6HC permitiendo la regulación del desplazamiento swarming, haciendo que la bacteria adquiera una transformación morfológica que le permita migrar sobre superficies semisólidas, a través de la producción de una sustancia que actué rompiendo la tensión superficial, comportándose como un biosurfactante bacteriano.es_MX
dc.language.isoeses_MX
dc.publisherCentro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C.es_MX
dc.titleParticipación de las moléculas señal acilo homoserina lactona, en la movilidad swarming en vibrio spp, aislada de raices del mangle negro aviccenia germinanses_MX
dc.documento.idcibnor.2007.davila_aes_MX
dc.documento.indicedavila_aes_MX
dc.documento.instcibnores_MX
dc.dirtesis.gradoMaestría en Ciencias en el Uso, Manejo y Preservación de los Recursos Naturaleses_MX
dc.dirtesis.disciplinaBiotecnologíaes_MX
dc.dirtesis.universidadCentro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C.es_MX
dc.dirtesis.facultadPosgrado en Recursos Naturaleses_MX
dc.documento.fechaAgosto, 2007es_MX
dc.description.abstractenIn bacterial cell-cell communication, the use of mollecular signals or autoinductors allows the regulation of physiological processes known as quorum sensing, when certain population density is reached within a bacterial population. In gram-negative bacteria, the production of acyl homoserine lactone (AHL) autoinductor takes part in the regulation of genes related in production of antibiotics, virulence factors, transference of plásmids and a type of coordinated migration, known as swarming. The swarming movility in bacteria, is observed in semisolid condition, in wich the bacteria present a morphologic modification (increase of cellular size and lateral flagellum production), and the production of substances, known as biosurfactants, that help to break the superficial tension. Works with pathogenic bacteria in animals, reported that the AHLs were related in the production of biosurfactants, that allowed the colonization in the tissue. Nevertheless, this movility in bacteria isolated from roots of plants is not reported. The bacteria Vibrio strain LR6HC, isolated from roots of mangle black, with a promotional potential of growth in plants, showed mollecular signals 4C, 6C and 8C-HL on the base of the techniques bacterial biosensors, thin layer chromatography(TLC), and spectrometry of masses (GM/SM). In addition, it was observed that the bacterium presented swarming mobility in 3 different semisolids means, with different nutrition sources, getting to detect different types from mobility, depending on means where one moves. In order to relate the regulation of the AHL in the swarming movility, was made a cancellation of the production of the molecule signal, of an intercellular form, on the basis of the action of enzyme AiiA, one lactonasa that hidrolize the lactone ring of the AHL, not allowing its union with the transcripcional regulator. It was made a conjugación, between stock LR6HC and the stock and E. coli, which presented/displayed pDSK519::aiiA plasmíd. Transconjugants were obtained, and a search was made of which they did not produce AHLs, not detected by bacterial biosensors and it was verified by TLC and GM/SM. It was observed in the transconjugants, the lack of mobility swarming in different means semisolids and one verified by electronic microscopy of sweeping and transmission, that the morphology of the cell did not present modifications in its size, nor in its cellular structures. It was observed that the cells in displacement situation swarming, had a size of up to 2 µm of diameter, presenting multiple lateral flagella and detecting the presence of a substance or veil, that completely covered the migration with the bacteria. It was analyzed, through methods for detection and quantification of biosurfactants, that the transconjugant stock presented/displayed a diminution marked in the production of a substance that can behave like active tense agent. In addition, I detect a diminution of until a 60%, on the part of the nonproducing stock transconjugant of AHLs, in the production of biofilms, which are related to the biosurfactants production in Pseudomonas aureoginosa and Burkholderia cepacia. In conclusion, the production of AHLs signal, in the stock Vibrio LR6HC allowing the regulation of the swarming movility, causing that the bacterium acquires a morphologic transformation that allows him to migrate on surfaces semisolids, through the production of a substance which I acted breaking the superficial tension, behaving like a bacterial biosurfactant.es_MX
dc.documento.subjectQuórum sensing; AHLs; swarming; Vibrio; biosurfactanteses_MX


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