Determinación de las condiciones básicas para el cultivo primario in vitro de células de manto de la madreperla Pinctada mazatlanica (Hanley, 1856)

Abstract

El género Pinctada es utilizado en el perlicultivo comercial a nivel mundial. En este proceso, un fragmento de manto de la zona paleal de una ostra perlera (donador) es implantado en la gónada de otras ostras (receptores). Sin embargo el método para el cultivo de perlas esféricas es ineficiente. En el presente trabajo se realizó la búsqueda de métodos alternativos al perlicultivo: el cultivo in vitro del manto de P. mazatlanica. Por ello se realizó investigación preliminar dirigida a sentar las bases para el establecimiento de un cultivo primario in vitro de tejido y células del manto de la especie. La presente tesis tiene como objetivo determinar las condiciones básicas para llevar a cabo el cultivo in vitro de células aisladas y explantes del manto, evaluando cinco diferentes formas de disgregación enzimática celular, tres medios de cultivo para permitir la supervivencia de explantes, dos sustratos (con y sin poli-D-lisina) para las células y el manto, cuatro osmolaridades del medio de cultivo para el manto, además de la absorción de calcio del manto in vitro. Se obtuvo que la colagenasa (tipo I con una actividad específica de 414 U/mg) permitió los mejores rendimientos medidos como número de células viables disgregadas a 37°C por 60 minutos. La siembra de células disgregadas se dio mejor en el medio RPMI 1640, mantenido a 37°C con sustrato poli-D-lisina. El cultivo de explantes resultó ser mejor en el medio RPMI 1640 a 60 mM de NaCl, y en estas mismas condiciones se evidenció la absorción de calcio por medio de espectrofotometría de absorción atómica. Se puede concluir que los resultados preliminares generados en la presente investigación proporcionan un panorama claro del rumbo que deben seguir los futuros estudios dentro de este campo tan novedoso de la investigación científica y tecnológica. Se recomienda evaluar otras temperaturas, y utilizar el análisis digital de imágenes como método de cuantificación de procesos importantes como la absorción de calcio, así como realizar este tipo de estudios con la otra especie de ostra perlera mexicana Pteria sterna.