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dc.contributor.advisorAscencio Valle, Felipees_MX
dc.contributor.authorEstrada Muñoz, Norma Angélicaes_MX
dc.date.issued2005es_MX
dc.identifier.urihttp://dspace.cibnor.mx:8080/handle/123456789/100
dc.description.abstractEste trabajo documenta los efectos que tienen las toxinas del dinoflagelado Gymnodinium catenatum, un conocido productor de toxinas paralíticas de moluscos (PSP), en el sistema de defensa de juveniles de la almeja mano de león Nodipecten subnodosus. Estas toxinas tienen una acción bloqueante reversible y altamente específica de los canales de sodio, evitando la generación del potencial de acción en membranas excitables. Las almejas se alimentaron con diferentes concentraciones del dinoflagelado tóxico en condiciones controladas de laboratorio para determinar las tasas de ingestión y aclaramiento durante 7 horas en dos tallas; se realizaron cortes histológicos para observar el efecto de las toxinas en los distintos tejidos. Se llevaron a cabo experimentos donde se alimentó durante periodos cortos (menores a 24 h) y periodos largos de hasta 12 d con G. catenatum, suplementando la dieta con Isochysis galbana. Asimismo, se provocó un estrés severo mediante la inyección del extracto crudo de las toxinas en el músculo aductor. La extracción de las toxinas, así como la toxicidad de G. catenatum se determinaron mediante el método de ensayo ratón (AOAC), así como se obtuvo la dosis letal media (DL50) del extracto crudo de estas toxinas en N. subnodosus. Se estudió el efecto de las toxinas en términos de producción de moléculas relacionadas al sistema de defensa: enzimas antioxidantes (catalasa, superóxido dismutasa, glutatión peroxidasa), sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS: peróxidación de lípidos), enzimas hidrolíticas (lisozima, proteasas, glicosidasas, fosfatasas, lipasas y esterasas) acetilcolinesterasa, óxido nítrico, así como el conteo total de hemocitos. En los experimentos de alimentación se determinaron los efectos en los tejidos (branquias, glándula digestiva, manto y músculo) mientras que en los experimentos de inyección del extracto crudo los efectos se evaluaron en la hemolinfa. Los resultados del presente estudio muestran que los juveniles N. subnodosus no exhibieron aparentemente respuestas fisiológicas adversas cuando se alimentaron con el dinoflagelado tóxico G. catenatum a diferentes tiempos, sin embargo a concentraciones elevadas de alimento la talla más pequeña presentó la producción de pseudoheces, el cierre parcial de las valvas y la reducción en las tasas de alimentación, recuperándose después de unas horas; se observó melanización en branquias y manto, así como acumulación de hemocitos en tejidos. Al parecer estos dinoflagelados pueden formar parte de los requerimientos nutricionales, y la baja sensibilidad a las toxinas podría deberse a un mecanismo interno en los canales de sodio que inhibe la unión de las toxinas con sus receptores específicos. Sin embargo, debido a un estrés severo provocado por la inyección de las toxinas a dosis subletales, se observó la retracción del manto y la falta de capacidad del cierre de las valvas en un 60% de los organismos estudiados, los cuales en su mayoría se recuperaron a las 120 h, lo cual se reflejó en algunas de las enzimas estudiadas. La mayoría de estas enzimas se presentaron tanto en los tejidos como en la hemolinfa. Las enzimas antioxidantes no mostraron efectos evidentes. Se detectaron enzimas hidrolíticas que pueden en un momento dado servir de indicadores del sistema de defensa como lisozima, fosfatasa ácida,  glucuronidasa, tripsina y  quimiotripsina, así como otras moléculas relacionadas al sistema neuroinmune como la acetilcolinesterasa y la óxido nítrico las cuales también mostraron diferencias significativas. Asimismo, el conteo total de hemocitos también fue un buen indicador. Debido al estrés severo al parecer N. subnodosus experimentó periodos de inmunosupresión durante las primeras 24 horas, con una posterior recuperación, lo cual se reflejo claramente tanto en el conteo de hemocitos como en la mayoría de las enzimas lisosomales medidas en la hemolinfa y esto puede ser debido a la baja sensibilidad de las toxinas además del efecto reversible de estas.es_MX
dc.language.isoeses_MX
dc.publisherCentro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C.es_MX
dc.titleEfecto de las toxinas paralíticas (PSP) del dinoflagelado Gymnodinium catenatum (Dinophyceae) en el sistema de defensa de la almeja mano de león, Nodipecten subnodosuses_MX
dc.documento.idcibnor.2005.estrada_nes_MX
dc.documento.indiceestrada_nes_MX
dc.documento.instcibnores_MX
dc.dirtesis.gradoMaestría en Ciencias en el Uso, Manejo y Preservación de los Recursos Naturaleses_MX
dc.dirtesis.disciplinaBiotecnologíaes_MX
dc.dirtesis.universidadCentro de Investigaciones Biológicas del Noroeste, S.C.es_MX
dc.dirtesis.facultadPosgrado en Recursos Naturaleses_MX
dc.documento.fechaMarzo, 2005es_MX
dc.description.abstractenThis work documents the effects caused by toxins from the dinoflagellate Gymnodinium catenatum, a known producer of Paralytic shellfish poisoning (PSP) toxins, in the defense system of Pacific lion’s paw scallop juveniles, Nodipecten subnodosus. The mode of action of these toxins involves a reversible and highly specific block of ion transport by the sodium channel and thus of the action potential in excitable membranes. The scallops were fed with different concentrations of the toxic dinoflagellate under laboratory controlled conditions to determine the ingestion and clearance rates during 7 h in two sizes; histological records were made to observe the effect of the toxins in the different tissues. Short ( 24h) and long (until 12 d) term feeding experiments with G. catenatum were carried out, supplementing the diet with a mixture of Isochrysis galbana. A severe stress was caused by means of the injection of the crude extract of the toxins in the adductor muscle. The extraction of the toxins as well as G. catenatum toxicity were carried out by mouse bioassay method (AOAC), and also lethal media dose (DL50) of these extracts was determined in N. subnodosus.The effect of the toxins in the defense system was determined: antioxidant enzymes (catalase, superoxide dismutase, gluthatione peroxidase), thiobarbitiuric acid reactive substances (TBARS: lipid peroxidation), hydrolytic enzymes (lysozyme, proteases, glycosidases, phosphatases, lypases and estereases), acetylcholinesterase, nitric oxide, as well as the total hemocyte count. In feeding experiments, the tissues were analyzed (gills, digestive gland, mantle and muscle) while in the experiments of injection of the crude extract the effects were determined in the hemolymph. The results of the present study show that the juveniles of N. subnodosus exhibited no apparent detrimental physiological responses during the feeding experiments with G. catenatum at different times, nevertheless at high concentrations of food the smallest size showed pseudofeces production, partial shell clousure and reduction of the feeding rates, recovering their physiological state after some hours; melanization in mantle and gills and hemocyte aggregation were observed. Apparently these dinoflagellates can form part of the nutritional requirements of the scallop and the low sensitivity to the toxins would be due to an internal mechanism in the sodium channels that inhibit the union of the toxins with its specific receptors. However, the effect of the severe stress caused by the injection at sublethal doses, lead to mantle retraction and incapacity of shell clousure in aproximate 60% of the studied organisms, the majority of wich recovered at 120 h, which was reflected in some of the enzymes studied. The majority of these enzymes were present in both the tissues and hemolymph. The antioxidant enzymes did not show evident effects. Hydrolitic enzymes were detected that are able to serve of indicators of the defense system as lysozyme, acid phosphatase,  glucuronidase, trypsin and  chymotrypsin, as well as other molecules related to the neuroimmune system such as acetylcholinesterase and nitric oxide which also showed significant differences. Likewise, the total hemocyte count also was a good indicator. Due to the severe stress, it seems that N. subnodosus experienced periods of immunosupresion during the first 24 h with a subsequent recovery, which clearly reflected in the count of hemocytes as in the majority of the lysosomal enzymes measured in the haemolymph and this can be attributed to the reduced sensitivity to toxins in addition to their reversible effect.es_MX
dc.documento.subjectNodipecten subnodosus; Gymnodinium catenatum; PSP; enzimas; defensaes_MX


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    Esta colección contiene texto completo de las tesis de Maestría y Doctorado del Programa de Posgrado del CIBNOR.

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